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집  /  두더지/ DNA 추출을 위한 “DNA-sorb-PCR” 키트의 구성. 핵산 신톨의 정제 및 분리용 시약

"DNA-sorb-PCR" DNA 분리 키트의 구성입니다. 핵산 신톨의 정제 및 분리용 시약

""DNA-sorb-S-M" ® AmpliSens FBUN Rospotrebnadzor 역학 중앙 연구소, 러시아 연방 연구 전용, 111123 및 기타 비의료 목적, 모스크바, ..."

지침

시약 키트 사용에 대해

생물학적 물질로부터 DNA 추출용

"DNA-소르브-S-M"

AmpliSense

FBUN 중앙역학연구소

Rospotrebnadzor,

연구 목적으로만 사용

러시아 연방, 111123,

기타 비의학적 목적

모스크바시, Novogireevskaya 거리, 건물 3A

약어 목록

목적

방법의 원리

완성의 형태

동물의 생물학적 물질에서 DNA 추출................................ 8

동물 사료 또는 식물 원료

인쇄된 제품에 사용된 기호

양식 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / 페이지 2/15

약어 목록

안에 이 지시의다음 약어 및 명칭이 사용됩니다.

DNA – 디옥시리보핵산 NA – 핵산 OK – 음성 추출 대조 OKO – 음성 대조 샘플 PC – 양성 대조군추출 PKO – 양성 대조 샘플 PCR – 중합효소 연쇄 반응



– 연방 국영 기관과학

FBUN 중앙연구소

"중앙역학·역학연구소" 연방 서비스소비자 권리 및 인간 복지 보호를 위한 Rospotrebnadzor 분야 감독

목적

"DNA-sorb-S-M" 시약 키트는 동물의 생물학적 물질(조직(생검(피부 및 점막))에서 DNA를 추출하기 위한 것입니다. 비뇨생식기계, 위장관, 기관지), 수술 및 부검) 재료; 중합효소연쇄반응(PCR)을 이용한 후속 연구를 위해 식품, 생물학적 첨가물, 동물 사료 또는 식물 재료로부터 DNA를 추출합니다.

DNA 추출은 PCR 방법의 분석 전 절차입니다.

추출을 위한 테스트 샘플의 용량: 100 µl (10 ~ 100 µl 용량의 샘플 또는 10 ~ 100 mg의 무게를 가진 샘플이 허용됩니다)1.

주목! 수집 절차, 테스트 물질의 운송 및 보관 조건, DNA 추출 준비의 필요성과 절차, 간섭 물질 및 샘플과 관련된 제한 사항에 대한 정보는 시약 세트에 대한 지침을 참조하세요. 증폭에 사용됩니다.

방법의 원리

검체2를 Proteinase K가 포함된 용해액으로 처리하면 세포막이 파괴되어 NK 및 세포성분이 방출됩니다. 용해된 NC는 흡착제 입자에 결합하는 반면, 용해된 테스트 물질의 다른 구성 요소는 용액에 남아 있으며 흡착제 침전 중에 제거됩니다. 사용되는 증폭 시약 키트에 대한 지침을 참조하세요.

일부 유형의 생물학적 물질에는 시료 준비 단계가 필요합니다. 센티미터.

증폭에 사용되는 시약 키트에 대한 지침.

형태 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / 3/15 페이지 원심분리 및 후속 흡착제 세척. 용출 완충액이 흡착제에 추가되면 NC는 실리카 표면에서 용액으로 이동하고 원심분리에 의해 흡착제 입자에서 분리됩니다. 이 절차의 결과로 증폭 반응 억제제가 없는 고도로 정제된 NA 제제가 얻어지며, 이는 PCR 연구의 높은 분석 감도를 보장합니다.

완성의 형태

시약 키트는 2가지 구성으로 제공됩니다.

Form 1에는 "DNA-sorb-S-M" 버전 50 시약 세트가 포함되어 있습니다.

Form 2에는 "DNA-sorb-S-M" 버전 100 시약 세트가 포함되어 있습니다.

주의 사항 및 폐기 정보

동물의 생물학적 물질을 연구할 때 작업은 1997년 1월 27일 러시아 연방 농무부 규정 No. 13-7-2/840 "진단 작업 수행 규칙"에 따라 수행되어야 합니다. 중합효소연쇄반응법을 사용하는 실험실. 기본 조항”을 수의학과의 승인을 받았습니다.

식품, 생물학적 첨가물, 동물 사료 또는 식물 원료를 연구할 때 작업은 지침 MU 1.3.2569-09 "작업 시 핵산 증폭 방법을 사용하는 실험실 작업 조직"의 요구 사항을 준수하여 수행되어야 합니다. 병원성 그룹 I-IV "및 GOST R 53214-2008"식품의 미생물을 포함하는 물질. 유전자 검출을 위한 분석 방법 변형된 유기체그리고 그로부터 파생된 제품.

일반 요구 사항 및 정의."

작업할 때는 항상 다음 요구 사항을 준수해야 합니다.

– 실험실 프로세스는 단방향이어야 합니다. 분석은 별도의 공간(구역)에서 수행됩니다. 작업은 추출 구역에서 시작하여 증폭 및 감지 구역에서 계속되어야 합니다. 이전 처리 단계가 수행된 장소에 샘플, 장비 또는 시약을 반환하지 마십시오.

– 사용하지 않은 시약, 만료된 시약 및 양식 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / 4/15페이지 중고 시약, 포장3, 생물학적 물질(재료, 기구 및 오염된 생물학적 물질 포함) , SanPiN 2.1.7.2790-10 "의료 폐기물 관리를 위한 위생 및 역학 요구 사항"의 요구 사항에 따라 폐기해야 합니다.

– 각 작업마다 자동 필터 피펫용 일회용 팁을 사용하고 교체합니다4. 일회용 플라스틱 식기는 소독에 사용할 수 있는 소독제가 들어 있는 특수 용기에 폐기해야 합니다. 의료 폐기물.

– 검체 준비에 사용된 기구(막자 및 막자)와 금속 기구(메스, 가위, 핀셋, 믹서기 부착물 등)는 소독액(예: 0.2% 디클로로이소시아누르산 나트륨염 용액)에 1시간 동안 보관합니다. , 계면활성제 세제를 함유한 수돗물로 세척하고, 흐르는 탈이온수로 세척한 후 건열오븐에서 180℃에서 4시간 동안 건조시켰다.

– 시약 키트는 지정된 수의 샘플에 대한 연구를 수행하기 위해 일회용으로 만들어졌습니다("구성" 섹션 참조).

– 이 지침에 따라 시약 키트를 사용할 준비가 되었습니다.

시약 키트는 원래 목적에 맞게 엄격하게 사용하십시오.

– 내부 포장이 손상되었거나 훼손된 경우에는 시약 키트를 사용하지 마십시오. 모습시약이 설명과 일치하지 않습니다.

– 지침에 따른 운송 및 보관 조건을 준수하지 않은 경우 시약 키트를 사용하지 마십시오.

사용하지 않은 시약, 만료된 시약, 사용한 시약, 포장은 의료 폐기물 위험 등급 G에 속합니다.

필터가 없는 일회용 팁을 사용하여 추출 과정에서 진공흡입기를 사용하여 상층액을 제거합니다.

양식 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / 페이지 5/15

– 유효기간이 지난 시약키트는 사용하지 마세요.

– 시료 및 시약을 다룰 때는 일회용 비분말 장갑, 실험실 가운, 보안경을 사용하십시오. 작업을 마친 후에는 손을 깨끗이 씻으십시오. 모든 작업은 인체와의 접촉을 피하기 위해 장갑을 착용하고만 수행됩니다.

– 증기 흡입, 피부, 눈, 점막 접촉을 피하고 삼키지 마십시오. 접촉된 경우 즉시 해당 부위를 물로 헹구고 필요한 경우 의사의 진료를 받으십시오. 의료.

– 시약 안전 데이터 시트(SDS – 안전 데이터 시트)는 요청 시 제공됩니다.

다음을 초래할 수 있는 예상 사건 평가 부정적인 결과인체의 경우:

의도한 대로 사용하고 위의 주의 사항을 준수할 경우 인체와의 접촉이 배제됩니다.

긴급 상황에서는 다음이 가능합니다.

– 민감한 사람의 눈 점막 자극,

– 민감한 사람의 피부 자극,

- 알레르기 반응,

– 흡입하면 해로움

- 경구로 복용하면 해롭다.

시약 키트가 인체에 미치는 특정 효과:

– 발암효과가 없습니다.

– 돌연변이 유발 효과가 없습니다.

– 생식 독성이 없습니다.

추가 재료 및 장비

(제조업체/공급업체 표시):

1. 1.5 및 5.0mL 일회용 폴리프로필렌 나사 체결형 또는 밀봉형 튜브(예: Axygen, Inc.

("Exigen, Inc"), 미국 또는 유사).

2. 최대 200μl 및 최대 1000μl의 필터가 있는 가변 용량 피펫용 일회용 팁(예: Axygen, Inc., USA 또는 이와 유사한 제품).

3. 최대 200μl의 가변 용량 피펫용 일회용 팁(예: Axygen, Inc., USA 또는 이와 유사한 제품).

양식 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / 페이지 6/15

4. 1.5 ml 튜브용 랙(예: Axygen, Inc., USA 또는 이와 유사한 제품).

5. 층류 후드, 생물학적 안전 등급 II 유형 A(예: "BAVp-01-"Laminar-S"-1,2", JSC "Laminar Systems", 러시아 또는 유사).

6. Eppendorf 튜브용 온도 조절 장치(25~100°C)(예: SIA Biosan, Latvia 또는 이와 유사한 제품).

7. 25~100°C의 Eppendorf 튜브용 온도 조절기 셰이커(예: TS-100, SIA Biosan, Latvia 또는 유사 제품).

8. Eppendorf 튜브용 미세원심분리기 최대 속도최소 12,000g의 원심분리(예: MiniSpin, Eppendorf(Eppendorf Manufacturing Corporation), Manufacturing Corporation Germany 또는 유사).

9. 소용돌이(예: SIA Biosan, 라트비아 또는 이와 유사한 것).

10. 상등액을 제거하기 위한 트랩 플라스크가 있는 의료용 진공 흡인기(예: "OM-1", LLC "Utes", 러시아 등).

11. 자동 가변 용량 디스펜서(예: Biohit LLC, 러시아 또는 유사 제품).

12. 냉장고는 2~8°C, 냉동고는 영하 24~영하 16°C입니다.

13.MU 1.3.2569-09에 따라 별도의 가운, 모자, 신발 및 일회용 장갑을 착용하십시오.

14.일회용 플라스틱 용기물질의 폐기 및 비활성화를 위해.

–  –  –

동물의 생물학적 물질에서 DNA 추출

2. 나사 또는 꼭 맞는 캡이 있는 1.5ml 일회용 폴리프로필렌 튜브를 필요한 수만큼 선택합니다(PCR 연구를 위해 제공된 경우 음성 및 양성 추출 컨트롤 포함).

용해 시약 완충액과 세척액 1을 2~8C 온도에서 보관할 경우 결정 형태의 침전물이 형성될 수 있습니다.

양식 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / 페이지 8/15

3. BKO6 10μl를 각 튜브에 추가합니다(PCR 연구용으로 제공된 경우). 튜브에 용해 시약 완충액 400 μl와 용해 시약 17 μl를 추가합니다.

4. 각 샘플에 대한 필터가 있는 별도의 팁을 사용하여 준비된 튜브에 100 µl의 테스트 샘플6을 추가합니다.

주목! 400 µl의 용해 시약용 완충액과 17 µl의 용해 시약을 필요한 양의 테스트 샘플이 들어 있는 튜브에 추가할 수 있으며 10 µl의 BKO7을 여기에 추가할 수 있습니다(PCR 연구용으로 제공되는 경우). 필터.

5. NCO 100μl를 음성 대조군(NC) 추출 튜브에 첨가하고, NKO 90μl와 PCO 10μl를 양성 대조군(PC) 추출 튜브에 첨가합니다(추출 대조군이 PCR 연구를 위해 제공되는 경우).6

6. 뚜껑을 꼭 닫고 잘 섞은 후 방울을 흔들어 섞습니다.

튜브를 64°C의 온도 조절 장치에 1시간 동안 놓고 주기적으로 소용돌이로 혼합합니다(10~12분마다 5회). 60°C의 온도에서 12시간 동안 인큐베이션합니다.

7. 10,000g에서 5분 동안 원심분리하여 용해되지 않은 샘플 입자를 펠렛화합니다(예: Eppendorf Manufacturing Corporation의 MiniSpin 마이크로원심분리기의 경우 12,000rpm).

8. 필터가 달린 별도의 팁을 사용하여 매우 조심스럽게(부유 입자와 지방 방울을 피함) 200~350 µl의 상등액을 취하고 새 튜브로 옮깁니다. 소용돌이로 방울을 침전시킵니다.

9. 범용 흡착제를 재현탁시키고 볼텍스를 이용해 세게 저어줍니다. 별도의 팁을 사용하여 각 튜브에 재현탁된 범용 흡착제 25μl를 추가하고 뚜껑을 단단히 닫습니다.

볼텍스로 혼합하고 랙에 10분 동안 방치하며 2분마다 저어줍니다.

테스트 및 대조 샘플의 용량을 변경할 수 있습니다. 증폭에 사용되는 시약 세트에 대한 지침을 참조하세요.

양식 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / 페이지 9/15

18.다음 단락에 나오는 세척 절차를 반복하십시오. 15-16, 상층액을 완전히 제거합니다.

19. 뚜껑이 열린 시험관을 64°C 온도 조절 장치에 5~10분 동안 놓아 범용 흡착제를 건조시킵니다.

20.용출 완충액 B 50~100μl를 튜브에 추가합니다(사용된 증폭 시약 키트에 대한 지침 참조).

흡착제가 완전히 재현탁될 때까지 소용돌이로 혼합합니다. 64°C 온도 조절 장치에 5~10분 동안 놓고 볼텍스를 사용하여 주기적으로(분당 1회) 저어줍니다.

정제된 DNA는 2~8°C에서는 1주일, 영하 24~영하 16°C에서는 6개월, 영하 68°C를 넘지 않는 온도에서는 1년 동안 보관할 수 있다. 이렇게 하려면 흡착제를 포착하지 않고 상등액을 새 시험관으로 옮겨야 합니다.

양식 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / 페이지 10/15

식품, 생물학적 첨가물로부터 DNA 추출,

동물 사료 또는 식물 원료

주목! DNA 추출을 위한 생물학적 물질을 준비하는 절차와 테스트 샘플의 양은 사용되는 증폭 시약 키트의 지침을 참조하세요.

1. 용해 시약 완충액과 세척액 1(2~8°C에서 보관한 경우), 결정이 완전히 용해될 때까지 64°C에서 따뜻하게 합니다.

2. 사전 처리된 테스트 샘플이 포함된 1.5ml 튜브를 랙에 놓습니다(샘플 볼륨/수량, 사용된 증폭 시약 키트에 대한 지침 참조).

3. 음성 추출 컨트롤(EC)을 위해 나사 또는 꼭 맞는 캡이 있는 1.5mL 일회용 폴리프로필렌 튜브를 준비합니다. 시험관에 OKO 100μl를 첨가합니다.

4. 테스트 샘플과 TC가 들어 있는 시험관에 용해 시약용 완충액 400μl와 용해 시약 17μl를 첨가합니다.

5. 뚜껑을 꼭 닫고 잘 섞은 후 한 방울씩 잘 섞어줍니다.

튜브를 온도가 64°C인 온도 조절 장치에 1시간 동안 놓고 주기적으로 소용돌이로 혼합하거나(10~12분마다 5회) 셰이커 온도 조절 장치를 사용합니다.

6. 10,000g에서 5분 동안 원심분리하여 용해되지 않은 샘플 입자를 펠렛화합니다(예: Eppendorf Manufacturing Corporation의 MiniSpin 마이크로원심분리기의 경우 12,000rpm).

7. 나사 또는 꼭 맞는 캡이 있는 새 일회용 1.5ml 폴리프로필렌 튜브를 필요한 수만큼 선택합니다.

8. 범용 흡착제를 재현탁시키고 볼텍스를 이용해 세게 저어줍니다. 별도의 팁을 사용하여 각 튜브에 재현탁된 범용 흡착제 25μl를 추가하고 뚜껑을 단단히 닫습니다.

9. 용해된 샘플이 있는 튜브에서 필터가 있는 별도의 팁을 사용하여 매우 조심스럽게(부유 입자 및 지방 방울의 유입을 피하면서) 200~350μl의 상청액을 채취하고 흡착제가 포함된 튜브로 옮깁니다. 볼텍스로 혼합하고 랙에 10분 동안 방치하며 2분마다 저어줍니다.

양식 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / 페이지 11/15

10.마이크로 원심분리기에서 튜브를 2,000g에서 1분간 원심분리합니다(예: Eppendorf Manufacturing Corporation의 MiniSpin 마이크로원심분리기의 경우 5,000rpm).

11. 흡착제를 포획하지 않고 진공 흡인기를 사용하여 200 µl 필터 없이 별도의 팁을 사용하여 각 튜브에서 상층액을 제거합니다.

12. 시험관에 세척액 1 300μl를 넣고 뚜껑을 단단히 닫은 후 범용 흡착제가 완전히 재현탁될 때까지 와류시킵니다.

13.튜브를 미세원심분리기에서 2,000g으로 1분간 원심분리합니다.

14. 흡착제를 포착하지 않고 진공 흡인기를 사용하여 필터 없이 별도의 200 µl 팁을 사용하여 각 튜브에서 상등액을 제거합니다.

15. 시험관에 세척액 2 500μl를 넣고 뚜껑을 단단히 닫은 후 범용 흡착제가 완전히 재현탁될 때까지 vortex합니다.

16. 미세 원심분리기에서 튜브를 7,000g(예: Eppendorf Manufacturing Corporation의 MiniSpin 미세 원심분리기의 경우 10,000rpm)에서 1분간 원심분리합니다.

17. 흡착제를 포착하지 않고 진공 흡인기를 사용하여 필터 없이 별도의 200μl 팁을 사용하여 각 튜브에서 상등액을 제거합니다.

18.다음 단락에 나오는 세척 절차를 반복하십시오. 15-16, 상등액을 완전히 제거합니다.

19. 뚜껑이 열린 시험관을 온도 64°C의 온도 조절 장치에 5~10분 동안 놓아 범용 흡착제를 건조시킵니다.

20.용출 완충액 B 50μl를 튜브에 첨가합니다. 흡착제가 완전히 재현탁될 때까지 소용돌이로 혼합합니다. 64°C 온도 조절 장치에 5~10분 동안 놓고 볼텍스를 사용하여 주기적으로(분당 1회) 저어줍니다.

21. 튜브를 미세원심분리기에서 10,000g으로 1분간 원심분리합니다. 상등액에는 정제된 DNA가 포함되어 있습니다. PCR을 위한 샘플이 준비되었습니다.

정제된 DNA는 2~8°C에서 일주일, 영하 24~영하 16°C에서 6개월, Form 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12에서 보관 가능 /27/16 / 페이지 12 / 15 일년 내내 영하 68 °C를 넘지 않아야 합니다. 이렇게 하려면 흡착제를 포착하지 않고 상등액을 새 시험관으로 옮겨야 합니다.

유통기한, 운송 및 보관 조건.

유효 기간. 12 개월 만료된 시약 키트는 사용할 수 없습니다. 개봉한 시약의 만료 날짜는 지침에 달리 명시되지 않는 한 개봉되지 않은 시약의 라벨에 표시된 만료 날짜와 일치합니다.

운송. 시약 키트는 모든 유형의 차량에서 차가운 요소가 들어 있는 열 용기에 담아 2~8C의 온도에서 5일 이내에 운송해야 합니다. 수령 후 지정된 보관 온도에 따라 분해하십시오.

저장. 용해 시약을 제외하고 시약 키트를 2~25C의 온도에서 보관하십시오. 용해 시약을 2~8C 온도의 냉장고에 보관하세요.

냉장실은 조절된 온도 조건을 제공해야 합니다.

    용해 용액 30 cm 3,

    세척액 1 30 cm 3,

    세척 용액 2 20 cm 3 용 농축액,

    흡착제 현탁액 2 cm 3,

    DNA 용출 완충액 4 cm 3 .

운영 절차:

    별도의 병에 키트의 농축액 20cm3, 증류수 80cm3, 96% 에탄올 100cm3를 혼합하여 세척액 2를 준비합니다. 솔루션을 다음 위치에 저장하세요. 실온단단히 조여진 병에 담겨 있습니다.

    흡착제의 상태를 확인하십시오. 침전 시 흡착제는 현탁액 부피의 약 절반을 차지해야 합니다.

    단단히 닫힌 1.5cm3 폴리프로필렌 튜브(바람직하게는 나사 캡 포함)에 미리 준비된 테스트 샘플(음성 또는 양성 샘플) 100μl를 추가하고 용해 용액(별도의 팁을 사용하여 각 샘플에) 300μl를 추가하고 혼합합니다. 3~10회 피펫팅하여 완전히 제거합니다.

    재현탁된 흡착제 15 - 20 µl를 추가하고 소용돌이로 잘 섞은 다음 흡착제가 완전히 침전되도록 5-7분 동안 랙에 놓습니다.

    3~8,000rpm에서 30초 동안 미세원심분리기에서 흡착제를 침전시킵니다. 별도의 팁을 사용하여 각 튜브에서 상등액을 채취합니다(진공 흡입을 사용하는 것이 편리합니다).

    세척액 1 300μl를 첨가하고 흡착제가 완전히 재현탁될 때까지 볼텍스로 혼합하고(흡착제가 심하게 부서지면 피펫으로 분해) 원심분리기에서 4~8,000rpm으로 30초 동안 침전시킵니다. 별도의 팁을 사용하여 각 튜브에서 상층액을 수집합니다.

    800 μl의 세척액 2를 첨가하고 흡착제가 완전히 재현탁될 때까지 vortex한 후 미세원심분리기에서 6~10,000rpm의 속도로 30초 동안 침전시킨 후 상층액을 수집합니다.

    6단계를 반복하고, 상등액을 주의 깊게 선택하고, 흡착제 침전물을 항온조에서 65°C에서 5분간 건조시킵니다.

    30-40 μl의 용출 완충액에 흡착제를 재현탁하고 65°C 온도 조절 장치에 5분 동안 놓고 주기적으로 소용돌이로 흔들어 줍니다.

    최대 속도로 1분 동안 미세원심분리기에서 침전물을 침전시킵니다.

샘플은 PCR 준비가 되었습니다. 상층액에는 정제된 DNA가 포함되어 있습니다.

DNA 추출 단계에서 음성 대조군으로 식염수나 탈이온수를 사용해야 합니다.

DNA-sorb-PCR 키트를 이용한 DNA 추출 효율은 30~60%입니다.

임상자료

혈장, 혈청

긁기, 정자, 인두 세척, 소변

생검, 혈액, 대변

피펫팅 수

흡착제량

흡착제 증착 속도

8,000rpm

6,000rpm

3~4천rpm

용리액량

DNA 추출 효율

5.2. 단계 2. PCR 증폭을 위한 키트의 PCR 구성 설정:

    5x 반응 완충액(점성이 있는 투명한 파란색 용액)

    탈이온수.2000 µl

    뉴클레오티드 혼합물.500 µl

    Taq 폴리머라제.100 µl

    프라이머 혼합물.500 µl

    PCR용 왁스.2000 µl

    양성 대조군: 100μl

    음성 대조군 100 µl

    미네랄 오일 4000 µl

키트는 영하 20°C에서 1년 동안 보관됩니다.

신속한 마이크로컬럼 DNA 추출 방법은 혈액, 혈장, 타액, 소변, 세포 배양 및 완충액 내의 모든 세포 펠릿에서 전체 DNA를 추출하도록 설계되었습니다. 분리된 DNA의 순도가 높기 때문에 모든 유형의 분석에 사용할 수 있습니다.

    분리 시간은 샘플 수에 따라 30~45분입니다.

  • 컬럼 막에 대한 DNA의 효과적인 결합을 통해 샘플에서 가장 높은 수율의 DNA를 얻을 수 있습니다.
  • 용해 및 세척 용액 성분의 최적화된 구성 덕분에 높은 수준의 정제가 달성됩니다.
  • 다른 흡착제 추출 방법에 비해 세척 중 DNA 조각화 및 손실이 크게 감소했습니다.
  • 용출액의 부피를 줄여 DNA를 농축할 수 있으며;
  • 컬럼에서 DNA를 추출하면 추가 플라스틱 소비가 크게 줄어듭니다.
  • 최대 샘플량 - 200 µl;
  • 키트에는 Proteinase K가 포함되어 있습니다.
  • 분리된 DNA의 순도는 A260/A280 비율에 따라 1.8-1.9입니다.
  • 추출된 DNA의 양은 샘플의 종류와 수량에 따라 다릅니다. 혈액 200μl의 DNA 생산량은 평균 5-6μg입니다.

게놈 DNA "DNA-Extran" 분리용 시약 세트

DNA-Extran 시리즈의 게놈 DNA 분리용 키트를 사용하면 혈액, 박테리아 및 동물 세포 배양물, 동식물의 신선 조직, 냉동 조직, 건조 조직 등 다양한 생물학적 물질로부터 DNA를 분리할 수 있습니다.

  • 세포에서 DNA를 완벽하게 추출하여 정제 과정에서 DNA 손실과 단편화를 최소화합니다.
  • 분리된 DNA는 높은 레벨순도(A260/A280 비율 = 1.8-1.9)이며 PCR, 제한 분해, 혼성화 및 기타 연구에 적합합니다.
  • 키트에는 페놀, 클로로포름과 같은 잠재적으로 위험한 성분이 포함되어 있지 않으며, 대량의 플라스틱이 필요하지 않으며 독성 폐기물을 생성하지 않습니다.

자성입자 "M-Sorb-Tube"에서 DNA 추출을 위한 시약 세트

객담, 기관지 세척액, 뇌척수액, 삼출물, 점상액, 생검, 소변, 생식기 분비물 및 세포 배양물에서 마이코박테리아 DNA를 분리하는 데 적합합니다. 임상 물질의 예비 처리는 미생물학 연구를 위한 샘플 준비를 위한 표준 절차에 따라 수행됩니다(2003년 3월 21일 러시아 보건부 명령 번호 109 "항결핵 조치 개선에 관하여"). 러시아 연방", 부록 11 "결핵의 검출, 진단 및 치료에 대한 미생물학 연구의 통합 방법에 대한 지침"). 임상물질을 불활성화하기 위해서는 당사가 개발한 불활화액 A를 사용하는 것이 좋습니다.

A액은 12시간 이내에 마이코박테리아를 사멸시키고, 임상물질을 소독하여 추가 분석(DNA 추출, PCR 등)에 활용 가능합니다. 용액 A는 객담 치료에 특별히 적합하며 NaOH-NALC 용액을 사용하는 표준 절차를 완전히 대체하고 탁월한 점액 용해 특성을 가지고 있습니다. 비활성화 용액 A는 표준 NaOH-NALC 샘플 준비에 비해 DNA 수율을 증가시킵니다.

분리 기술에는 구아니딘 이소티오시아네이트를 사용한 DNA 용해, 자성 입자에 대한 DNA 흡착, 원심분리에 의한 DNA 침전, 세척 단계 및 DNA 용출이 포함됩니다. 다른 미생물로부터 DNA를 분리하는 데 사용할 수 있습니다.

    실리카겔 코팅 자성 입자를 흡착제로 사용하는 것은 다른 흡착제에 비해 기술적으로 더 진보되고 편리한 형식이며 DNA 추출 기술의 최대 표준화 및 자동화를 허용합니다.

    내부 양성 대조군(IPC)을 각 테스트 샘플에 추가하고, RT-PCR 억제제의 유무와 DNA 추출 효율을 IPC 증폭 반응으로 결정합니다.

식품 및 식품원료로부터 DNA 추출을 위한 시약 키트

"Sorb-GMO-A" 및 "Sorb-GMO-B" 시약 키트는 식물 재료, 식품 및 사료에서 DNA 추출을 위해 특별히 설계되었습니다. 두 키트 모두 DNA 정제를 위해 실리콘 흡착제를 사용합니다. "Sorb-GMO-A"는 용해제로 염화구아니딘을 함유하고 있으며, "Sorb-GMO-B"는 이온성 CTAB 세제로 식물 성분에서 최대 DNA 수율을 보장합니다. 고유 한 특징 Sorb-GMO-A 키트의 장점은 DNA 추출 속도와 클로로포름이 없어 키트 작업이 더 안전하다는 것입니다.

물 샘플(자성 입자)에서 DNA 추출을 위한 시약 세트 "M-Sorb-Leg"

Legionella DNA 추출용으로 설계되었습니다. 수역 환경(냉각탑, 수영장, 워터파크, 냉온수 공급 시스템) 레지오넬라의 최소 분리 농도는 샘플 0.5리터당 100개 세포입니다.

"M-Sorb-Leg" 키트는 두 가지 변형으로 생산됩니다. 1~1000ml 용량의 물 샘플용 "M-Sorb-Leg1000"과 최대 용량의 물 샘플용 "M-Sorb-Leg1" 1ml. M-Sorb-Leg1000 세트는 폴리카보네이트 필터를 사용하여 물을 여과하는 기능을 제공합니다.

    M-Sorb-Leg 시약 세트를 사용하면 심하게 오염된 물 샘플에 존재하는 PCR 억제제를 제거할 수 있습니다.

  • DNA 분리 기술은 실리카겔 코팅 자성 입자에 DNA를 흡착시킨 후 침전 시약을 사용하여 침전시키는 방법을 기반으로 합니다. 수착법과 총침전법의 장점을 결합한 제품입니다.
  • 내부 양성 대조군(IPC)을 각 테스트 샘플에 추가하고, RT-PCR 억제제의 유무는 IPC 증폭 반응에 의해 결정됩니다.

환경 물체(자성 입자)로부터 DNA 추출을 위한 시약 세트 "M-Sorb-OOM"

M-Sorb-OOM 시약 세트는 특히 위험한 미생물(DOM)에 감염된 것으로 의심되는 환경 개체(토양, 물, 동물 사체 등)로부터 DNA를 분리하여 후속 분석을 준비하는 데 사용됩니다. RT-PCR . 분리 절차는 M-Sorb-Leg 키트에 대해 설명된 절차와 유사합니다.

RNA 분리용 시약 세트 "RNA-Extran"

이 키트는 혈액, 조직 단편 및 세포 배양물에서 RNA를 분리하기 위한 것입니다. RNA-Extran 키트를 사용하여 얻은 RNA는 RT-PCR과 hybridization 분석, in vitro 번역 및 cloning에 모두 사용할 수 있습니다.

RNA 분리의 원리는 Khomchinsky에 따른 산성 페놀 추출을 기반으로 하며, 여기서 RNA만 수성상에 남아 있고 단백질과 복합체를 이루는 DNA는 유기상으로 전달됩니다. 구아니딘 티오시아네이트는 세포성 뉴클레아제의 분리 및 변성제로 사용됩니다.

    DNA 불순물이 없는 고도로 정제된 RNA를 얻을 수 있습니다.

    전혈, 조직 단편 및 세포 배양물에서 RNA를 완벽하게 추출합니다.

    손상되지 않은 RNA를 얻을 수 있습니다.

  • RNA 분리 시간 - 1시간.
카탈로그 번호 이름 반응 수
EX-509 전혈에서 게놈 DNA를 분리하기 위한 시약 세트 "DNA-Extran-1" 100
EX-511 동물 및 인간 조직에서 DNA 추출을 위한 시약 "DNA-Extran-2" 세트 100
EX-512 박테리아 배양물에서 DNA 추출을 위한 시약 "DNA-Extran-3" 세트 100
EX-513 식물 조직에서 DNA 추출을 위한 시약 "DNA-Extran-4" 세트 100
EX-514 컬럼에서 전체 DNA를 분리하기 위한 시약 세트 "K-Sorb"(혈액, 타액, 소변, 세포 배양, 상피 세포 긁어내기) 100
EX-515 혈액, 조직, 세포 배양물로부터 RNA를 분리하기 위한 시약 "RNA-Extran" 세트 50
OM-505 임상 시료 및 세포 배양물(자성 입자)에서 DNA 추출을 위한 시약 "M-Sorb-Tub" 세트 50 또는 100
GM-502-50 “SORB-GMO-A” (구아니딘 + 흡착제) 식물 소재 및 식품에서 DNA 추출을 위한 시약 세트 50
GM-503-50 “SORB-GMO-B” (CTAB+sorbent) 식물 소재 및 식품으로부터 DNA 추출을 위한 시약 세트 50
OM-506 최대 1000ml의 물 시료에서 레지오넬라균 DNA를 분리하기 위한 시약 세트 "M-Sorb-Leg1000"(자성 입자의 경우 필터는 별도로 제공됨) 50 또는 100
OM-507 최대 1ml의 물 샘플에서 레지오넬라 DNA를 분리하기 위한 시약 세트 "M-Sorb-Leg1"(자성 입자) 50 또는 100
OOM-502 환경 물체(자성 입자)로부터 DNA 추출을 위한 시약 세트 "M-sorb-OOM" 50 또는 100

주문정보
이름 용량생산방법 고양이 번호
“GMO-MagnoSorb”(구아니딘 + 자성 흡착제) 식물 재료 및 식품에서 DNA 추출을 위한 시약 세트 50개 할당신톨실시간 PCR GM-505-50
“SORB-GMO-A” (구아니딘 + 흡착제) 식물 소재 및 식품에서 DNA 추출을 위한 시약 세트 50 신톨실시간 PCR GM-502-50-50
“SORB-GMO-B” (CTAB+sorbent) 식물 소재 및 식품으로부터 DNA 추출을 위한 시약 세트 50 신톨실시간 PCR GM-503-50-50
임상 샘플 및 배양 세포(자기 입자)에서 마이코박테리아 DNA를 분리하기 위한 시약 세트 "Amplitub-RV" 키트 No. 1("M-Sorb-Tub") 50 신톨실시간 PCR OM-505
전혈에서 게놈 DNA를 분리하기 위한 시약 세트 "DNA-Extran-1" 100 신톨실시간 PCR EX-509-100
동물 및 인간 조직에서 DNA 추출을 위한 시약 "DNA-Extran-2" 세트 100 신톨실시간 PCR EX-511
박테리아 배양물에서 DNA 추출을 위한 시약 "DNA-Extran-3" 세트 100 신톨실시간 PCR EX-512-100
식물 조직에서 DNA 추출을 위한 시약 "DNA-Extran-3" 세트 100 신톨실시간 PCR EX-513-100
컬럼에서 전체 DNA를 분리하기 위한 시약 세트 "K-Sorb"(혈액, 타액, 소변, 세포 배양, 상피 세포 긁어내기) 100 신톨실시간 PCR EX-514-100
반응 48개신톨실시간 PCR GM-443-48
시약 세트 “Soya / 35S+FMV / NOS 스크리닝” 반응 50개신톨실시간 PCR GM-416-50