DNA 分離キット「DNA-sorb-PCR」の構成。 核酸の精製および単離用試薬 シントール
「「DNA-sorb-S-M」® AmpliSens FBUN ロスポトレブナゾル疫学中央研究所、研究専用、ロシア連邦、111123、およびその他の非医療目的、モスクワ、..."
説明書
試薬キットの使用について
生体材料からの DNA 抽出用
「DNA-sorb-S-M」
アンプリセンス
FBUN中央疫学研究所
ロスポトレブナゾル
研究目的のみ
ロシア連邦、111123、
およびその他の非医療目的
モスクワ市、ノボギレエフスカヤ通り、建物 3A
略語のリスト
目的
方法の原理
完了の形式
動物の生体物質からの DNA の抽出................................................................ 8
動物の飼料または植物原料印刷製品で使用されている記号
フォーム 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / ページ 2/15
略語のリスト
で この指示の次の略語と名称が使用されます。
DNA – デオキシリボ核酸 NA – 核酸 OK – ネガティブ抽出コントロール OKO – ネガティブコントロールサンプル PC – ポジティブコントロール抽出 PKO – 陽性対照サンプル PCR – ポリメラーゼ連鎖反応
- 連邦政府 国の資金提供を受けた組織科学
FBUN中央研究所
「疫学中央研究所」 連邦政府サービス消費者の権利と人間の福祉の保護のため、ロスポトレブナゾルの分野における監督のため目的
「DNA-sorb-S-M」試薬キットは、動物の生体材料である組織(生検(皮膚および粘膜))からの DNA 抽出を目的としています。 泌尿器系、消化管、気管支)、外科および解剖)材料。 ポリメラーゼ連鎖反応 (PCR) を使用した、その後の研究のための食品、生物学的添加物、動物飼料、または植物材料からの DNA 抽出。DNA 抽出は、PCR 法の分析前手順です。
抽出用の試験サンプルの量: 100 μl (10 ~ 100 μl の量または重量が 10 ~ 100 mg のサンプルが許容されます)1。
注意! 採取手順、試験材料の輸送と保管の条件、DNA 抽出の準備の必要性と手順、およびサンプルに関連する妨害物質と制限に関する情報については、試薬セットの説明書を参照してください。増幅に使用されます。
方法の原理
試験サンプル 2 はプロテイナーゼ K を含む溶解溶液で処理され、細胞膜が破壊され、NK および細胞成分が放出されます。 溶解した NC は吸着剤粒子に結合しますが、溶解した試験材料の他の成分は溶液中に残り、吸着剤の沈殿中に除去されます。試験される材料に応じて、使用する増幅試薬キットの説明書を参照してください。一部の種類の生物学的材料には、サンプル前処理ステップが必要です。 Cm。
増幅に使用する試薬キットの説明書。
形態 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / page 3/15 遠心分離とその後の吸着剤の洗浄による。 溶出緩衝液が吸着剤に添加されると、NC はシリカ表面から溶液中に移動し、遠心分離によって吸着剤粒子から分離されます。 この手順の結果、増幅反応阻害剤を含まない高度に精製された NA 調製物が得られ、PCR 研究の高い分析感度が保証されます。
完了の形式
試薬キットは 2 つの構成で利用できます。
Form 1 には、試薬セット「DNA-sorb-S-M」バージョン 50 が含まれています。
Form 2 には、試薬セット「DNA-sorb-S-M」バージョン 100 が含まれています。
注意事項と廃棄に関する情報
動物からの生物学的物質を研究する場合、1997 年 1 月 27 日のロシア連邦農業石油省の規則 No. 13-7-2/840「診断における作業の実施規則」に従って作業を実行する必要があります。ポリメラーゼ連鎖反応法を使用した研究室。 基本規定」、獣医学部によって承認されました。食品、生物学的添加物、動物飼料または植物原料を研究する場合、その作業はガイドライン MU 1.3.2569-09「核酸増幅法を使用する研究室の作業の組織化」の要件に従って実行する必要があります。病原性グループ I ~ IV の微生物を含む物質」および GOST R 53214-2008「食品。 遺伝子検出のための解析手法 改変された生物およびそれらから得られる製品。
一般的な要件と定義。」
作業するときは、常に次の要件に従う必要があります。
– 研究室のプロセスは一方向である必要があります。 分析は別の部屋(ゾーン)で実行されます。 作業は抽出ゾーンで開始し、増幅および検出ゾーンで継続する必要があります。 サンプル、機器、または試薬を、前のプロセスステップが実行されたエリアに戻さないでください。
– 未使用の試薬、期限切れの試薬、およびフォーム 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / ページ 4/15 使用済み試薬、包装 3、生物材料(生物材料に汚染された材料、機器および品目を含む) 、SanPiN 2.1.7.2790-10「医療廃棄物の管理に関する衛生的および疫学的要件」の要件に従って廃棄する必要があります。
– 自動フィルターピペットの使い捨てチップを操作ごとに使用および交換します4。 使い捨てのプラスチック製器具は、消毒に使用できる消毒剤が入った特別な容器に廃棄する必要があります。 医療廃棄物.
– サンプル調製に使用した皿(乳鉢および乳棒)および金属器具(メス、ハサミ、ピンセット、ブレンダーアタッチメントなど)を消毒液(たとえば、ジクロロイソシアヌル酸のナトリウム塩の 0.2% 溶液)に 1 時間保管します。界面活性剤洗剤を使用して水道水で洗浄し、流水と脱イオン水で洗浄した後、乾熱オーブンで 180℃の温度で 4 時間乾燥させました。
– 試薬キットは、指定された数のサンプルの研究を実行するために 1 回限りの使用を目的としています (「組成」のセクションを参照)。
– 試薬キットは、これらの説明書に従って使用する準備ができています。
試薬キットは本来の目的にのみ使用してください。
– 内箱が破損している場合や破損している場合は、試薬キットを使用しないでください。 外観試薬が説明と一致しません。
– 指示に従って輸送および保管条件が守られていない場合は、試薬キットを使用しないでください。
未使用の試薬、期限切れの試薬、使用済みの試薬、包装は、医療廃棄物の危険性クラス G に属します。
フィルターのない使い捨てチップは、真空アスピレーターを使用した抽出プロセス中に上清を除去するために使用されます。
フォーム 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / ページ 5/15
– 使用期限を過ぎた試薬キットは使用しないでください。
– サンプルや試薬を扱うときは、使い捨てのパウダーフリー手袋、白衣、保護眼鏡を使用してください。 作業終了後は手をよく洗いましょう。 人体との接触を避けるため、すべての操作は手袋のみを使用して実行されます。
– 蒸気の吸入、皮膚、目、粘膜との接触を避け、飲み込まないでください。 接触した場合は、直ちに患部を水で洗い流し、必要に応じて医師の診断を受けてください。 医療.
– 試薬安全データシート (SDS – 安全データシート) は、ご要望に応じて入手可能です。
結果として起こる可能性のある事象の評価 マイナスの結果人体の場合:
意図どおりに使用し、上記の注意事項に従っている場合、人体との接触は排除されます。
緊急事態では、次のことが考えられます。
– 敏感な人の目の粘膜の刺激、
– 敏感な人の皮膚刺激、
- アレルギー反応、
– 吸入すると有害、
- 経口摂取すると有害です。
試薬キットの人体に対する具体的な影響:
– 発がん性の影響はありません。
– 変異原性の影響はありません。
– 生殖毒性はありません。
追加の資材と設備
(メーカー/サプライヤーを示す):1. 1.5 mL および 5.0 mL の使い捨てポリプロピレン製ねじ込み式チューブまたは密閉チューブ (Axygen, Inc. など)
(「Exigen, Inc」)、米国、または同様のもの)。
2. 最大 200 μl および最大 1000 μl のフィルターを備えた可変容量ピペット用の使い捨てチップ (たとえば、Axygen, Inc.、米国など)。
3. 最大 200 μl までの容量可変ピペット用の使い捨てチップ (たとえば、Axygen, Inc.、米国など)。
フォーム 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / ページ 6/15
4. 1.5 ml チューブ用ラック (例: Axygen, Inc.、米国、または類似品)。
5. 層流フード、生物学的安全性クラス II タイプ A (たとえば、「BAVp-01-「Laminar-S」-1、2」、JSC「Laminar Systems」、ロシア、または類似のもの)。
6. 25 ~ 100 °C のエッペンドルフ チューブ用サーモスタット (たとえば、SIA Biosan、ラトビアなど)。
7. 25 ~ 100 °C のエッペンドルフ チューブ用サーモスタット シェーカー (TS-100、SIA Biosan、ラトビアなど)。
8. エッペンドルフチューブ用微量遠心分離機 最大速度少なくとも12000gの遠心分離(例えば、MiniSpin、Eppendorf(Eppendorf Manufacturing Corporation)、Manufacturing Corporation Germany、または同様のもの)。
9. ボルテックス (たとえば、SIA Biosan、ラトビアなど)。
10. 上澄み液を除去するためのトラップフラスコを備えた医療用真空吸引器 (たとえば、「OM-1」、LLC「Utes」、ロシア、または類似のもの)。
11.自動可変容量ディスペンサー (たとえば、Biohit LLC、ロシア、または類似のもの)。
12. 冷蔵庫は 2 ~ 8 °C、冷凍庫はマイナス 24 ~ マイナス 16 °C。
13. MU 1.3.2569-09 に従って、ローブ、帽子、靴、使い捨て手袋を分離します。
14.使い捨て プラスチック容器材料の廃棄および不活性化に使用します。
–  –  –
動物の生体物質からの DNA の抽出
2. 必要な数のネジまたはしっかりとフィットするキャップ付きの 1.5 ml 使い捨てポリプロピレン チューブ (PCR 研究用に用意されている場合は、ネガティブおよびポジティブ抽出コントロールを含む) を選択します。
溶解試薬バッファーおよび洗浄溶液 1 を 2 ~ 8℃の温度で保存すると、結晶の形で沈殿が形成される可能性があります。
フォーム 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / ページ 8/15
3. 各チューブに 10 μl の BKO6 を加えます (PCR 研究用に提供される場合)。 400 μl の溶解試薬バッファーと 17 μl の溶解試薬をチューブに加えます。
4. サンプルごとにフィルターを備えた個別のチップを使用して、100 μl のテストサンプル 6 を準備したチューブに加えます。
注意! 溶解試薬用のバッファー 400 µl と溶解試薬 17 µl を、必要な量の試験サンプルが入ったチューブに追加し、そこに BKO7 10 µl を追加できます (PCR 研究用に提供されている場合)。フィルター。
5. 100 μl の NCO をネガティブコントロール (NC) 抽出チューブに加え、90 μl の NKO と 10 μl の PCO をポジティブコントロール (PC) 抽出チューブに加えます (抽出コントロールが PCR 研究に提供されている場合)。6
6. 蓋をしっかりと閉め、完全に混合し、液滴をボルテックスします。
チューブを温度 64 °C のサーモスタットに 1 時間置き、定期的にボルテックスで混合します (10 ~ 12 分ごとに 5 回)。 60 °C の温度で 12 時間インキュベートします。
7. 10,000 g で 5 分間遠心分離して、未溶解のサンプル粒子をペレット化します (たとえば、MiniSpin 微量遠心分離機、Eppendorf Manufacturing Corporation の場合は 12,000 rpm)。
8. フィルター付きの個別のチップを使用して、慎重に 200 ~ 350 µl の上清を採取し (浮遊粒子や脂肪滴を避けて)、新しいチューブに移します。 ボルテックスにより液滴を沈殿させます。
9. ボルテックスを使用して激しく撹拌しながら、ユニバーサル吸着剤を再懸濁します。 再懸濁したユニバーサル吸着剤 25 μl を個別のチップで各チューブに加え、蓋をしっかりと閉めます。
ボルテックスで混合し、2分ごとにかき混ぜながらラックに10分間放置します。
テストサンプルとコントロールサンプルの量を変更することは可能です; 増幅に使用する試薬セットの説明書を参照してください。
フォーム 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / ページ 9/15
18.次の段落にある洗浄手順を繰り返します。 15~16、上清を完全に除去します。
19. 蓋を開けたまま試験管を 64 °C のサーモスタットに 5 ~ 10 分間置き、万能吸着剤を乾燥させます。
20. 50 ~ 100 μl の溶出バッファー B をチューブに加えます (使用する増幅試薬キットの説明書を参照)。
吸着剤が完全に再懸濁するまでボルテックスで混合します。 64 °C のサーモスタットに 5 ~ 10 分間置き、ボルテックスを使用して定期的に (1 分に 1 回) かき混ぜます。
精製された DNA は、2 ~ 8 °C の温度で 1 週間、マイナス 24 ~ マイナス 16 °C の温度で 6 か月間、マイナス 68 °C 以下の温度で 1 年間保存できます。 これを行うには、吸着剤を捕捉せずに上清を新しい試験管に移す必要があります。
フォーム 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / ページ 10/15
食品、生物学的添加物、
動物の飼料または植物原料
注意! DNA 抽出用の生体材料の調製手順および検査サンプルの量については、使用する増幅試薬キットの説明書を参照してください。1. 溶解試薬バッファーと洗浄溶液 1 を 2 ~ 8 °C の温度で保存した場合は、結晶が完全に溶解するまで 64 °C の温度で温めます。
2. 前処理した試験サンプルを入れた 1.5 ml チューブをラックに置きます (サンプルの容量/数量、使用する増幅試薬キットの説明書を参照)。
3. ネガティブ抽出コントロール (EC) 用に、ネジまたはしっかりとフィットするキャップが付いた 1.5 mL 使い捨てポリプロピレン チューブを準備します。 100 μl の OKO を試験管に加えます。
4. 試験サンプルおよび TC を含む試験管に、溶解試薬用の緩衝液 400 μl および溶解試薬 17 μl を加えます。
5. 蓋をしっかりと閉め、完全に混合し、液滴をボルテックスします。
チューブを温度 64 °C のサーモスタットに 1 時間置き、ボルテックスで定期的に (10 ~ 12 分ごとに 5 回) 混合するか、シェーカーサーモスタットを使用します。
6. 10,000 g で 5 分間遠心分離して、未溶解のサンプル粒子をペレット化します (たとえば、MiniSpin 微量遠心分離機、Eppendorf Manufacturing Corporation の場合は 12,000 rpm)。
7. ネジまたはしっかりとフィットするキャップが付いた新しい使い捨て 1.5 ml ポリプロピレン チューブを必要な数選択します。
8. ボルテックスを使用して激しく撹拌しながら、ユニバーサル吸着剤を再懸濁します。 再懸濁したユニバーサル吸着剤 25 μl を個別のチップで各チューブに加え、蓋をしっかりと閉めます。
9. フィルター付きの個別のチップを使用して、溶解サンプルの入ったチューブから 200 ~ 350 μl の上清を慎重に採取し (浮遊粒子や脂肪滴の侵入を避けて)、吸着剤の入ったチューブに移します。 ボルテックスで混合し、2分ごとにかき混ぜながらラックに10分間放置します。
フォーム 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / ページ 11/15
10. チューブを微量遠心分離機で 2,000 g で 1 分間遠心分離します (たとえば、MiniSpin 微量遠心分離機、Eppendorf Manufacturing Corporation の場合は 5,000 rpm)。
11. 真空アスピレーターを使用して、吸着剤を捕捉せずに、200 μl のフィルターを使用せずに個別のチップで各チューブから上清を除去します。
12. 300 μl の洗浄溶液 1 を試験管に加え、蓋をしっかりと閉め、ユニバーサル吸着剤が完全に再懸濁するまでボルテックスします。
13. チューブを微量遠心機で 2,000 g で 1 分間遠心します。
14. 真空アスピレーターを使用し、吸着剤を捕捉せずに、フィルターなしの個別の 200 µl チップで各チューブから上清を除去します。
15. 500 μl の洗浄溶液 2 を試験管に加え、蓋をしっかりと閉め、ユニバーサル吸着剤が完全に再懸濁するまでボルテックスします。
16. チューブを微量遠心分離機で 7,000 g で 1 分間遠心分離します (たとえば、MiniSpin 微量遠心分離機、Eppendorf Manufacturing Corporation の場合は 10,000 rpm)。
17. 真空アスピレーターを使用し、吸着剤を捕捉せずに、フィルターなしの個別の 200 µl チップで各チューブから上清を除去します。
18.次の段落にある洗浄手順を繰り返します。 15-16、上清を完全に除去します。
19. 蓋を開けた試験管を温度 64 °C のサーモスタット内に 5 ~ 10 分間置き、万能吸着剤を乾燥させます。
20. 50 µl の溶出バッファー B をチューブに加え、吸着剤が完全に再懸濁するまでボルテックスで混合します。 64 °C のサーモスタットに 5 ~ 10 分間置き、ボルテックスを使用して定期的に (1 分に 1 回) かき混ぜます。
21. チューブを微量遠心機で 10,000 g で 1 分間遠心分離します。 上清には精製された DNA が含まれています。 サンプルは PCR の準備ができています。
精製された DNA は、2 ~ 8 °C の温度で 1 週間、マイナス 24 ~ マイナス 16 °C の温度で 6 か月間、およびフォーム 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12 の温度で保存できます。 /27/16 / ページ 12/15 年間を通じてマイナス 68 °C 以下。 これを行うには、吸着剤を捕捉せずに上清を新しい試験管に移す必要があります。
賞味期限、輸送および保管条件。
賞味期限。 12ヶ月 期限を過ぎた試薬キットは使用できません。 開封済み試薬の使用期限は、説明書に別段の記載がない限り、未開封試薬のラベルに記載されている使用期限と一致します。交通機関。 試薬キットは、あらゆる種類の屋根付き車両で、冷却要素を含む保温コンテナに入れて、2 ~ 8℃の温度で 5 日間以内に輸送する必要があります。 受け取ったら、指定された保管温度に従って分解してください。
ストレージ。 溶解試薬を除き、試薬キットは 2 ~ 25℃の温度で保管してください。 溶解試薬は冷蔵庫で 2 ~ 8℃ の温度で保存します。
冷蔵室は、制御された温度条件を提供する必要があります。
溶解溶液 30 cm 3、
洗浄液1 30cm3、
洗浄液用濃縮液 2 20 cm 3、
吸着剤懸濁液 2 cm 3、
DNA溶出バッファー4cm 3 。
操作手順:
キットの濃縮液 20 cm 3、蒸留水 80 cm 3、および 96% エタノール 100 cm 3 を別のボトルで混合して、洗浄溶液 2 を準備します。 溶液を次の場所に保存します。 室温しっかりと締められたボトルに入っています。
吸着剤の状態を確認します。沈降すると、吸着剤は懸濁液の体積の約半分を占めるはずです。
しっかりと閉じた 1.5 cm 3 ポリプロピレンチューブ (スクリューキャップ付きが望ましい) に、あらかじめ調製した試験サンプル、陰性または陽性サンプル 100 μl を加え、溶解溶液 300 μl (別々のチップで各サンプルに) を加え、混合します。 3 ~ 10 回ピペッティングして完全に洗浄します。
再懸濁した吸着剤 15 ~ 20 µl を加え、ボルテックスでよく混合し、ラックに 5 ~ 7 分間置いて吸着剤を完全に沈降させます。
吸着剤を微量遠心分離機で 3 ~ 8,000 rpm で 30 秒間沈殿させます。 別々のチップを使用して各チューブから上清を採取します (真空吸引を使用すると便利です)。
300 µl の洗浄液 1 を加え、吸着剤が完全に再懸濁するまでボルテックスで混合し (吸着剤がひどく分解した場合はピペットで砕きます)、遠心分離機で 4 ~ 8,000 rpm、30 秒間沈殿させます。 別々のチップを使用して各チューブから上清を収集します。
800 μl の洗浄溶液 2 を加え、吸着剤が完全に再懸濁するまでボルテックスし、微量遠心分離機で 6 ~ 10,000 rpm で 30 秒間沈殿させ、上清を回収します。
ステップ 6 を繰り返し、上清を慎重に選択し、吸着剤の沈殿物をサーモスタット内で 65 °C で 5 分間乾燥させます。
吸着剤を 30 ~ 40 μl の溶出バッファーに再懸濁し、65℃のサーモスタットに 5 分間置き、定期的にボルテックスで振盪します。
微量遠心分離機に最大速度で 1 分間かけて沈殿させます。
サンプルは PCR の準備ができており、上清には精製された DNA が含まれています。
DNA 抽出ステップ中のネガティブコントロールとして、生理食塩水または脱イオン水を使用する必要があります。
DNA-sorb-PCR キットを使用した DNA 抽出効率は 30 ~ 60% です。
臨床資料 |
血漿、血清 |
掻き取り、精子、咽頭洗浄、尿 |
生検、血液、糞便 |
ピペット操作の数 | |||
吸着剤の量 | |||
吸着剤の堆積速度 |
8000rpm |
6000rpm |
3~4000rpm |
溶離液の量 | |||
DNA抽出効率 |
5.2. ステージ 2. PCR 増幅用のキットの PCR 組成の設定:
5x 反応バッファー 1000 µl (粘性のある透明な青色の溶液)
脱イオン水 2000 µl
ヌクレオチドの混合物 500 μl
Taq ポリメラーゼ.100 μl
プライマー混合物 500 μl
PCR用ワックス 2000μl
ポジティブコントロール:100μl
ネガティブコントロール 100μl
ミネラルオイル 4000μl
キットはマイナス 20°C で 1 年間保管されます。
高速マイクロカラム DNA 抽出メソッドは、血液、血漿、唾液、尿、細胞培養物および緩衝液中の細胞ペレットから総 DNA を抽出するために設計されています。 単離された DNA は純度が高いため、あらゆる種類の分析に使用できます。
- DNA がカラムメンブレンに効果的に結合するため、サンプルから最高の収量で DNA を得ることができます。
- 溶解液と洗浄液の成分の最適化された組成により、高度な精製が達成されます。
- 他の吸着剤抽出法と比較して、洗浄中の DNA の断片化と損失が大幅に減少します。
- 溶出液の量を減らすことでDNAを濃縮することが可能です。
- カラムでの DNA 抽出により、追加のプラスチックの消費が大幅に削減されます。
- 最大サンプル量 - 200 μl。
- キットにはプロテイナーゼ K が含まれています。
- 単離された DNA の純度は、A260/A280 比に応じて 1.8 ~ 1.9 です。
- 抽出される DNA の量はサンプルの種類と量によって異なります。 200 μl の血液からの DNA 収量は平均 5 ~ 6 μg です。
分離時間はサンプル数に応じて 30 ~ 45 分の範囲です。
ゲノムDNA分離用試薬セット「DNA-Extran」
DNA-Extran シリーズのゲノム DNA 単離用キットを使用すると、血液、細菌および動物細胞の培養物、動植物の新鮮、凍結、または乾燥した組織など、さまざまな生物学的材料から DNA を単離できます。
- 細胞から完全に DNA を抽出し、精製中の DNA 損失と断片化を最小限に抑えます。
- 単離された DNA は 上級純度(A260/A280 比 = 1.8 ~ 1.9)であり、PCR、制限消化、ハイブリダイゼーションおよびその他の研究に適しています。
- このキットにはフェノールやクロロホルムなどの潜在的に危険な成分が含まれておらず、大量のプラスチックを必要とせず、有毒廃棄物も生成しません。
磁性粒子上でDNAを抽出するための試薬セット「M-Sorb-Tube」
喀痰、気管支洗浄液、脳脊髄液、滲出液、点状、生検、尿、生殖管分泌物、および細胞培養物からのマイコバクテリア DNA の単離に適しています。 臨床材料の前処理は、微生物学的研究のためのサンプル調製の標準手順に従って実行されます(2003 年 3 月 21 日付ロシア連邦保健省命令第 109 号「結核予防対策の改善について」)。 ロシア連邦」、付録 11「結核の検出、診断、治療における微生物学的研究の統一方法に関する指示」)。 臨床材料を不活化するには、当社が開発した不活化ソリューション A の使用をお勧めします。
溶液 A は 12 時間以内にマイコバクテリアを殺し、臨床材料を消毒します。これはさらなる分析 (DNA 抽出、PCR など) に使用できます。 溶液 A は喀痰の治療に特に適応され、NaOH-NALC 溶液を使用する標準的な手順を完全に置き換え、優れた粘液溶解特性を備えています。 不活化溶液 A は、標準的な NaOH-NALC サンプル前処理と比較して DNA 収量を増加させます。
分離技術には、イソチオシアン酸グアニジンによる DNA 溶解、磁性粒子への DNA 吸着、遠心分離による DNA 沈殿、洗浄段階、および DNA 溶出が含まれます。 他の微生物から DNA を分離するために使用できます。
シリカゲルでコーティングされた磁性粒子を吸着剤として使用することは、他の吸着剤と比較して技術的に進歩した便利な形式であり、DNA 抽出技術の最大限の標準化と自動化が可能になります。
内部陽性対照 (IPC) が各試験サンプルに添加され、RT-PCR 阻害剤の有無と DNA 抽出効率が IPC 増幅反応によって決定されます。
食品・食品原料からのDNA抽出用試薬キット
「Sorb-GMO-A」および「Sorb-GMO-B」試薬キットは、植物材料、食品、飼料からの DNA 抽出用に特別に設計されています。 どちらのキットも DNA 精製にシリコン吸着剤を使用します。 「Sorb-GMO-A」には溶解剤として塩化グアニジンが含まれており、「Sorb-GMO-B」はイオン性 CTAB 洗剤であり、植物成分からの DNA 収量を最大限に確保します。 特徴的な機能 Sorb-GMO-A キットの利点は、DNA 抽出の速度と、クロロホルムを使用しないため、キットの操作がより安全になることです。
水サンプルからのDNA抽出用試薬セット(磁性粒子上)「M-Sorb-Leg」
レジオネラ菌 DNA を分離するために設計されています。 水域 環境(冷却塔、スイミングプール、ウォーターパーク、温水および冷水供給システム)。 レジオネラ菌の最小分離濃度は、サンプル 0.5 リットルあたり 100 細胞です。
「M-Sorb-Leg」キットは、1 ~ 1000 ml の量の水サンプル用の「M-Sorb-Leg1000」と、最大 1000 ml の量の水サンプル用の「M-Sorb-Leg1」の 2 つの改良版で製造されています。 1ml。 M-Sorb-Leg1000 セットは、ポリカーボネート フィルターを使用して水のろ過を行います。
- DNA 分離技術は、シリカゲルでコーティングされた磁性粒子への DNA の収着と、それに続く沈殿試薬による沈殿に基づいています。 収着法と全沈殿法の利点を組み合わせています。
- 内部陽性対照 (IPC) が各試験サンプルに添加され、RT-PCR 阻害剤の有無が IPC 増幅反応によって決定されます。
M-Sorb-Leg 試薬セットを使用すると、重度に汚染された水サンプル中に存在する PCR 阻害剤を除去できます。
環境物体(磁性粒子)からのDNA抽出用試薬セット「M-Sorb-OOM」
M-Sorb-OOM 試薬セットは、特に危険な微生物 (DOM) に感染している疑いのある環境物体 (土壌、水、動物の死骸など) から DNA を分離し、その後の分析に備えることを目的としています。 RT-PCR。 分離手順は、M-Sorb-Leg キットで説明したものと同様です。
RNA分離用試薬セット「RNA-Extran」
このキットは、血液、組織断片、細胞培養物から RNA を単離することを目的としています。 RNA-Extran キットを使用して得られた RNA は、RT-PCR とハイブリダイゼーション分析、in vitro 翻訳、およびクローニングの両方に使用できます。
RNA 単離の原理は、コムチンスキーによる酸性フェノール抽出に基づいており、RNA のみが水相に残り、タンパク質と複合した DNA は有機相に移動します。 チオシアン酸グアニジンは、細胞ヌクレアーゼの単離および変性剤として使用されます。
- RNA の分離時間 - 1 時間。
DNA 不純物を含まない高度に精製された RNA を取得できます。
全血、組織断片、細胞培養物から RNA を完全に抽出します。
損傷を受けていない RNA を取得できます。
カタログ番号 | 名前 | 反応の数 |
EX-509 | 全血からゲノムDNAを分離するための試薬セット「DNA-Extran-1」 | 100 |
EX-511 | 動物およびヒトの組織からDNAを抽出するための試薬セット「DNA-Extran-2」 | 100 |
EX-512 | 細菌培養物からのDNA抽出用試薬セット「DNA-Extran-3」 | 100 |
EX-513 | 植物組織からDNAを抽出するための試薬セット「DNA-Extran-4」 | 100 |
EX-514 | カラム上でトータル DNA を分離するための試薬「K-Sorb」セット (血液、唾液、尿、細胞培養物、上皮細胞の掻き取り物から) | 100 |
EX-515 | 血液、組織、培養細胞からRNAを分離するための試薬セット「RNA-Extran」 | 50 |
OM-505 | 臨床サンプルおよび細胞培養物(磁性粒子上)からの DNA 抽出用試薬セット「M-Sorb-Tub」 | 50 または 100 |
GM-502-50 | 「SORB-GMO-A」(グアニジン+吸着剤) 植物素材や食品からのDNA抽出用試薬セット | 50 |
GM-503-50 | 「SORB-GMO-B」(CTAB+吸着剤) 植物素材や食品からのDNA抽出試薬セット | 50 |
OM-506 | 最大 1000 ml の水サンプルからレジオネラ DNA を分離するための試薬セット「M-Sorb-Leg1000」(磁性粒子については、フィルターは別途提供されます) | 50 または 100 |
OM-507 | 最大 1 ml の水サンプルからレジオネラ DNA を分離するための試薬セット「M-Sorb-Leg1」(磁性粒子上) | 50 または 100 |
OOM-502 | 環境物体(磁性粒子)からのDNA抽出用試薬セット「M-sorb-OOM」 | 50 または 100 |
注文情報
名前 | 音量 | 生産 | 方法 | カタログ番号 |
---|---|---|---|---|
「GMO-MagnoSorb」(グアニジン+磁性吸着剤) 植物素材や食品からのDNA抽出試薬セット | 50の割り当て | シンソール | リアルタイム PCR | GM-505-50 |
「SORB-GMO-A」(グアニジン+吸着剤) 植物素材や食品からのDNA抽出用試薬セット | 50 | シンソール | リアルタイム PCR | GM-502-50-50 |
「SORB-GMO-B」(CTAB+吸着剤) 植物素材や食品からのDNA抽出試薬セット | 50 | シンソール | リアルタイム PCR | GM-503-50-50 |
臨床サンプルおよび培養細胞(磁性粒子上)から抗酸菌 DNA を分離するための試薬セット「Amplitub-RV」キット No. 1(「M-Sorb-Tub」) | 50 | シンソール | リアルタイム PCR | OM-505 |
全血からゲノムDNAを分離するための試薬セット「DNA-Extran-1」 | 100 | シンソール | リアルタイム PCR | EX-509-100 |
動物およびヒトの組織からDNAを抽出するための試薬セット「DNA-Extran-2」 | 100 | シンソール | リアルタイム PCR | EX-511 |
細菌培養物からのDNA抽出用試薬セット「DNA-Extran-3」 | 100 | シンソール | リアルタイム PCR | EX-512-100 |
植物組織からDNAを抽出するための試薬セット「DNA-Extran-3」 | 100 | シンソール | リアルタイム PCR | EX-513-100 |
カラム上でトータル DNA を分離するための試薬「K-Sorb」セット (血液、唾液、尿、細胞培養物、上皮細胞の掻き取り物から) | 100 | シンソール | リアルタイム PCR | EX-514-100 |
48 件の反応 | シンソール | リアルタイム PCR | GM-443-48 | |
試薬セット「Soya/35S+FMV/NOSスクリーニング」 | 50 の反応 | シンソール | リアルタイム PCR | GM-416-50 |